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單核細胞活化測試是什么?

更新時間:2024-08-02  |  點擊率:420

單核細胞活化測試(Monocyte Activation Test,簡稱MAT)是一種體外檢測方法,主要用于評估供試品中是否存在能夠激活單核細胞釋放促炎細胞因子的污染物,如內(nèi)毒素、細菌、病毒、真菌等。這些污染物在人體內(nèi)可能引發(fā)發(fā)熱等不良反應,因此單核細胞活化測試在藥品、生物制品、醫(yī)療器械等領(lǐng)域的安全性評價中具有重要意義。

 

測試原理

單核細胞活化測試基于單核細胞或單核細胞系在受到外源性致熱原(如內(nèi)毒素)刺激后,會釋放一系列促炎細胞因子(如TNF-α、IL-1β、IL-6等)的生物學特性。通過檢測這些細胞因子的釋放量,可以間接反映供試品中污染物的致熱活性。

 

測試步驟

細胞準備:通常使用人外周血單核細胞或單核細胞系作為測試細胞。

孵育:將供試品與測試細胞在適宜條件下共孵育一段時間,使供試品中的污染物有機會激活單核細胞。

細胞因子檢測:通過酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)等定量檢測方法,檢測孵育后培養(yǎng)液中促炎細胞因子的濃度。

結(jié)果判讀:根據(jù)細胞因子的釋放量,判斷供試品中是否存在致熱原及其含量是否符合要求。

測試優(yōu)勢

靈敏度高:能夠檢測到極低濃度的內(nèi)毒素和其他致熱原。

非動物實驗:與家兔熱原檢測相比,單核細胞活化測試不需要使用實驗動物,符合倫理和環(huán)保要求。

省時經(jīng)濟:測試周期短,成本低,適合大規(guī)模篩查。

適用范圍廣:可檢測內(nèi)毒素和非內(nèi)毒素熱原,包括細菌、病毒、真菌等多種病原體。

注意事項

操作規(guī)范:測試過程中應嚴格遵守無菌操作規(guī)范,防止微生物和熱原的污染。

細胞質(zhì)量控制:測試細胞應具有良好的活性和純度,以保證測試結(jié)果的準確性。

結(jié)果解讀:細胞因子釋放量的高低受多種因素影響,如細胞類型、孵育條件等,因此應結(jié)合實際情況綜合判斷測試結(jié)果。

 

總之,單核細胞活化測試是一種重要的體外熱原檢測方法,在保障藥品、生物制品和醫(yī)療器械的質(zhì)量和安全性方面發(fā)揮著重要作用。


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