細(xì)胞培養(yǎng)過程中,由于實驗環(huán)境、操作者鼻腔口腔、實驗器材等很多地方都有支原體的存在。因此,細(xì)胞發(fā)生支原體污染的頻率很高。據(jù)美國數(shù)據(jù)統(tǒng)計,細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。
同時,由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過電鏡才能看到。因此,支原體污染不易被實驗者肉眼發(fā)覺。而支原體污染是個循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,被支原體污染的細(xì)胞會持續(xù)受到影響,導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。
支原體污染不僅是細(xì)胞培養(yǎng)中需要克服的現(xiàn)象,而且是制藥、生物制品生產(chǎn)中需要加以避免的。支原體污染的影響是什么?
抑制細(xì)胞增殖達(dá)50%
●影響免疫反應(yīng)
●影響病毒增殖和感染率
●引起染色體畸變和易位
●干擾雜交瘤技術(shù)使被污染細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基更敏感
●在細(xì)胞壁上附著支原體會改變細(xì)胞壁完整性。
●降低電穿孔轉(zhuǎn)染率達(dá)5%
總之,支原體污染影響細(xì)胞所有的代謝功能。
通常來說,被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細(xì)胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結(jié)合,破壞膜通透性,導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。