細(xì)菌真菌污染還有跡可循,起碼顯微鏡下能夠清晰地看到,但是支原體個(gè)子小,不易觀察,由于繁殖速度比較慢,期感染幾乎沒(méi)有癥狀。經(jīng)常稍不留意,就中了支原體的「陰招」。統(tǒng)計(jì)顯示,全球大約有60%左右的細(xì)胞培養(yǎng)存在或曾經(jīng)存在過(guò)支原體污染。
癥狀1:細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢甚至死亡?
被廣泛使用的細(xì)胞培養(yǎng)基,不僅給細(xì)胞提供支持和養(yǎng)分,對(duì)于支原體而言,也是天堂一般的存在。
與細(xì)胞培養(yǎng)高度重合的培養(yǎng)條件,注定了支原體要與細(xì)胞共同競(jìng)爭(zhēng)有限的生存資源。
早有研究表明[1],一些支原體(包括為常見(jiàn)的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過(guò)精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來(lái)供能。當(dāng)這些支原體混入細(xì)胞培養(yǎng)體系后,會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)精氨酸,導(dǎo)致細(xì)胞「吃不飽飯」,出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良的癥狀:生長(zhǎng)速率異常、活力下降、易脫壁等等。
而精氨酸又是細(xì)胞組蛋白的重要組成成分,缺乏精氨酸會(huì)嚴(yán)重影響組蛋白合成,引起染色體斷裂。再加上細(xì)胞處于長(zhǎng)qi饑餓的狀態(tài),終導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)變慢甚至死亡。
支原體感染癥狀2:細(xì)胞變形、碎片增加、易聚團(tuán)、有小黑點(diǎn)?
經(jīng)過(guò)支原體的這一番操作,細(xì)胞結(jié)構(gòu)已經(jīng)被嚴(yán)重破壞,隨之而來(lái)的就是細(xì)胞形態(tài)改變、細(xì)胞易聚團(tuán)、大面積細(xì)胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培養(yǎng)基中的碎片和小黑點(diǎn))
支原體也是如此——當(dāng)培養(yǎng)體系中感染了支原體并大量繁殖的時(shí)候,會(huì)向外排放代謝產(chǎn)物,影響體系中的PH,加快培養(yǎng)基變黃的速度。
支原體感染癥狀3:培養(yǎng)基易變黃?
綜上所述,如果你培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測(cè)試劑(檢測(cè)神器幫你揪出培養(yǎng)基中的支原體!)進(jìn)一步確認(rèn)。
除了影響細(xì)胞活力,支原體還會(huì)給細(xì)胞帶來(lái)的幾百種基因表達(dá)的改變,包括編碼受體、離子通道、生長(zhǎng)因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白,可以錨定在胞膜的外表面,被TLR2等免疫細(xì)胞的受體識(shí)別。激活NF-kB途徑,進(jìn)一步導(dǎo)致細(xì)胞活化[5],偏離終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
細(xì)胞培養(yǎng)小課堂到這里就結(jié)束了,希望可以幫你解決實(shí)驗(yàn)上的一些疑惑!