李斯特菌動力生化試劑盒
HiMotility™Biochemical Kit for Listeria
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價格 |
KBM003A | 李斯特菌動力生化試劑盒 | 5KT,10KT,20KT | 詢價 |
概況
該試劑盒為標準化的顯色檢測系統(tǒng),通過李斯特菌特異性的動力學、糖發(fā)酵和生化反應進行鑒定。微生物的發(fā)酵反應,引起培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。
用途
鑒定李斯特菌
使用說明
待鑒定菌種應先進行分離和純化。可在PALCAM瓊脂(貨號:M1064)上挑取一個菌落,接種在5ml腦心浸膏肉湯(貨號:M210)中,在35-37℃培養(yǎng)6-8小時,直到接種液濁度位于0.5-1.0McFarland標準之間。
無菌打開試劑盒,撕掉封條。劃線接種第1孔,不要接種第2孔。接下來用接種環(huán)接種第3至第12孔。接種液應到達孔底部。在35℃-37℃孵育18-24小時。
結(jié)果判定
依據(jù)結(jié)果詮釋表。在24-48小時孵育期結(jié)束后,在第4孔、第5孔和第6孔,分別添加如下試劑:
1) 動力試驗+七葉苷水解試驗:第1孔和第2孔
動力:有動力則菌落生長從第1孔轉(zhuǎn)移到第2孔,伴隨培養(yǎng)基變黑。
七葉苷水解:陽性則第1孔變黑,有動力則第2孔也變黑。
2)觸酶試驗:第3孔
用接種環(huán)刮取第1孔內(nèi)表面,將接種環(huán)蘸到含3%H2O2的干凈小試管中。
接種環(huán)表面冒泡為陽性。
接種環(huán)表面沒有冒泡為陰性。
注意:3%的H2O2需新鮮配置。
3)硝酸鹽還原試驗:第4孔
加1-2滴對氨基苯磺酸(貨號:R015)和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺(貨號:R009)
立即出現(xiàn)粉紅色為陽性
顏色無變化為陰性
4)伏-普試驗:第5孔
加3-4滴Barritt試劑A(貨號:R029)和1-2滴Barritt試劑B(貨號:R030)
10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽性
無顏色變化或有輕微變化為陰性。
5)甲基紅試驗:第6孔
加1-2滴甲基紅試劑(貨號:I007)
試劑保持紅色為陽性
試劑脫色變黃為陰性
6)糖發(fā)酵試驗:第7孔-第12孔
酸產(chǎn)生導致培養(yǎng)基顏色由紅變黃,為陽性反應。
如果仍保持紅色,則為陰性。
12種生化反應
1+2 | 動力試驗+七葉苷水解試驗 |
3 | 觸酶試驗 |
4 | 硝酸鹽還原試驗 |
5 | 伏普試驗 |
6 | 甲基紅試驗 |
7 | 木糖發(fā)酵試驗 |
8 | 乳糖發(fā)酵試驗 |
9 | α-甲基-D-甘露糖苷 |
10 | 鼠李糖發(fā)酵試驗 |
11 | 葡萄糖發(fā)酵試驗 |
12 | 甘露醇發(fā)酵試驗 |
鑒定的李斯特菌物種
格氏李斯特氏菌(Listeria grayi)
單核細胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)
英諾克李斯特菌(Listeria innocua)
斯氏李斯特氏菌(Listeria seeligeri)
伊氏李斯特氏菌伊氏亞種(Listeria ivannovii Sub sp. ivannovii)
伊氏李斯特菌倫敦亞種(Listeria ivannovii Sub sp. londoniesis)
威氏李斯特氏菌(Listeria welshimeri)
儲存條件及保質(zhì)期
2℃-8℃;12個月