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鑒別沙門與非沙門菌的兩款顯色培養(yǎng)基

更新時間:2018-09-14  |  點擊率:1829

美國細菌學家Salmon與Smith于1885年早分離出了豬霍亂沙門菌,為了紀念他的杰出貢獻,1990年將在這之前發(fā)現(xiàn)的傷寒桿菌和以后發(fā)現(xiàn)的與之特性相似的細菌一起定名為沙門菌屬。沙門氏菌(Salmonella)為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短桿菌,它比大腸桿菌細,也是腸桿菌科的一種重要的致病細菌。如果食用了被沙門氏菌污染的食品或者藥品后,將會引起中毒,導致傷寒、腸熱癥、敗血癥和胃腸炎等疾病。根據(jù)美國疾病控制和預防中心(CDC)的統(tǒng)計,每年在美國由沙門氏菌引發(fā)食源性疾病常常居于食源性疾病的前列;在歐洲,每年有超過16萬人感染沙門氏菌;而在中國,由沙門氏菌造成的食物中毒事件也層出不窮。因此建立有效快速的檢驗方法對于預防和控制沙門氏菌病十分重要。

 

目前在上用于檢測食品中沙門氏菌的方法主要有:ISO6579: 2002《食品和動物飼料的微生物學沙門氏菌檢測的水平方法》、美國FDA的《FDA分析手冊(2003年3月)》介紹的沙門氏菌的檢驗方法。在我國現(xiàn)行的沙門氏菌的檢驗的標準方法有:《食品安全國家標準食品衛(wèi)生微生物學檢驗沙門氏菌檢驗》(GB 4789.4-2016)、《GB 4789.31-2013 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌、志賀氏菌和致瀉大腸埃希氏菌的腸桿菌科噬菌體診斷檢驗》、《GB/T 22429-2008 食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗 酶聯(lián)免疫法》、《NY/T 550-2002 動物和動物產(chǎn)品沙門氏菌檢測方法》、《SN/T 4525.1-2016 出口食品中致病菌的分子分型MLST方法 第1部分:沙門氏菌》、《SN/T 1059.6-2016 出口食品中沙門氏菌屬檢測方法 第6部分:垂直膜過濾法》、《SN/T 2415-2010 進出口乳及乳制品中沙門氏菌快速檢測方法 實時熒光PCR法》、《SN/T 1059.7-2010 進出口食品中沙門氏菌檢測方法 實時熒光PCR法》。用于檢測藥品中沙門氏菌的方法主要有2014年版《美國藥典》USP37-NF32、我國的2015年版《中國藥典》。在上述的檢測標準中,一部分是以傳統(tǒng)的培養(yǎng)法為基礎(chǔ),根據(jù)沙門氏菌的繁殖及生長特性,建立了原理相似的檢定方案。

 

HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)了兩款沙門氏菌鑒別培養(yǎng)基,分別為HiCrome MM HiVeg Agar(貨號MV1393,無動物源成分)和HiCrome™ MM Agar Modified(貨號M1816,遵循ISO 17025:2005標準)。ISO 17025:2005即檢測和校準實驗室認可準則。產(chǎn)品名中的MM是Miller and Mallinson的簡稱,因為培養(yǎng)基的配方是以Miller和Mallison兩人的發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)的。這兩款顯色培養(yǎng)基都通過菌落顏色的不同,來區(qū)分沙門氏菌和非沙門氏菌。但具體效果有些差異。MV1393更突出了沙門氏菌(呈黑色)。而其他菌中,除了大腸桿菌為淡藍色外,其余為無色。而在M1816中,其他腸桿菌科有顯著的顏色,如弗氏檸檬酸桿菌為黃色,奇異變形桿菌為灰色,肺炎克雷伯菌為黃綠色,更容易區(qū)分鑒別,更適合存在奇異變形桿菌的樣品(見下圖)。

 

這兩款培養(yǎng)基都有發(fā)酵糖、pH指示劑、硫化氫指示系統(tǒng)及復合顯色劑。因為含有適當比例的發(fā)酵糖,因此在促進沙門氏菌生長方面優(yōu)于XLT4瓊脂。但這兩款培養(yǎng)基所含糖的種類不太一樣,MV1393含有纖維二糖、乳糖甘露糖醇和海藻糖,而M1816所含糖為纖維二糖、乳糖、蔗糖和木糖。通常情況下沙門氏菌和某些非沙門氏菌(如弗氏檸檬酸桿菌)均產(chǎn)生硫化氫,但培養(yǎng)基中的乳糖能抑制非沙門氏菌的硫化氫的產(chǎn)生,因而能將沙門氏菌與弗氏檸檬酸桿菌等區(qū)分開來。

 

HiCromeTM沙門氏菌鑒別培養(yǎng)基在上得到廣泛應用如Jvo Siegrist在研究沙門氏菌的鑒別中就有應用(Jvo Siegrist. Differentiation and Identification Media for Salmonella.microbiology focus[J].2009,1(3):2-7.)。D. Jako?iūn?等人調(diào)查歐洲某大型蛋制品生產(chǎn)企業(yè)中,是否因生產(chǎn)設(shè)備存在田納西沙門氏菌污染而導致了持續(xù)的蛋制品(盡管經(jīng)過了輕巴氏消毒)污染。在調(diào)查中也使用了該顯色培養(yǎng)基(D. Jako?iūn? ,M. Bisgaard , K. Pedersen. Demonstration of persistent contamination of a cooked egg product production facility with Salmonella enterica serovar Tennessee and characterization of the persistent strain. Journal of applied microbiology[J].2014,117(2):547-553)。

 

HiMedia的顯色培養(yǎng)基生產(chǎn)及產(chǎn)品均通過了 ISO9001、ISO13485、WHO的GMP認證、CE和FDA認證。其產(chǎn)品行銷140多個國家。

 

北京締一生物科技有限公司,作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,會一如既往地為您帶來的服務(wù)。

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